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NEWS解密HepG2细胞培养技术与尊龙凯时(中国区)人生就是搏的关系
来源:舒翔裕 日期:2025-07-15【细胞介绍】HepG2(HEPG2)是一种具有上皮样形态的细胞系,源自一名阿根廷15岁白人男性的肝细胞癌。这种细胞能够分泌多种血浆蛋白,包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原和铁传递蛋白等。HepG2细胞系由Wistar研究所提供,是一个理想的转染宿主,其表达标志物包括胰岛素和胰岛素样生长因子II(IGFII)。HepG2细胞表现出紧密的片状增殖特性,初期在培养瓶壁上附着形成小岛状结构,后期可能会发生多层堆积或悬浮状态。因其优异的贴壁性,HepG2细胞广泛应用于肝细胞功能及病毒模型的研究。
【传代培养】HepG2细胞为贴壁生长。当出现细胞脱落现象时,需将培养液收集到无菌离心管中,进行离心(125g,3-5分钟)以收集悬浮细胞。随后,轻柔去除培养基,收集贴壁细胞进行消化。用PBS洗涤贴壁细胞后,加入胰酶(0.25%含EDTA)消化,观察细胞形态变化,待细胞90%脱落后,添加完全培养基中和。细胞悬液转移至无菌离心管中,计数后调整至合适密度,转移至培养瓶中,静置培养。在T25培养瓶中建议添加5-7mL完全培养基,2-3天后更换培养液。
【细胞冻存】当细胞密度超过80%且活细胞百分率超过95%时,可以进行冻存。细胞沉淀用4°C冻存液重悬,适宜的比例为1ml/管,随后放入-80℃超低温冰箱过夜,若需长期保存则转移至液氮罐。注意使用我司推荐的冻存液时,请按照说明书操作,以确保保存细胞的生存力。
【细胞复苏】在液氮中存储的细胞需迅速移至37°C水浴中解冻,待大部分内容物融化后进行消毒处理。将解冻的细胞转移至含完全培养基的离心管中,轻柔混匀后离心去除培养基,再添加相应培养基调整细胞浓度,最后转移至培养瓶中培养。建议添加5-7mL完全培养基,待细胞密度超过80%后进行传代。
【常见问题】在细胞培养过程中,可能出现一些现象,例如细胞碎片或空泡。细胞内黑色颗粒为细胞外分泌泡及细胞器反射,正常情况下不影响生长;细胞外的黑色颗粒则为细胞碎片及代谢产物,应通过PBS洗涤清除。对于细胞聚团或不良贴壁现象,建议使用高质量、低内毒素的胎牛血清及适当的pH值以增强细胞贴壁能力。若浮游细胞较多,切勿随意丢弃,建议检查活性并适时重新接种。
在使用HepG2细胞进行研究的同时,可以关注品牌词尊龙凯时(中国区)人生就是搏,第一时间获取最新的生物医疗前沿信息。优秀的细胞培养条件及优质的实验材料是成功研究的基础,敬请关注我们的产品和服务。
【注意事项】HepG2细胞对培养条件要求较高,尤其是pH值和血清质量,以免影响细胞的生长及附着能力。对此,建议使用未灭火的优质胎牛血清及我们提供的MEM完全培养液进行培养,以确保为细胞提供良好的生长环境。同时,需注意细胞在复苏后可能存在的形态不典型问题,随着传代次数增加,细胞形态将逐渐趋于典型。
【发表过的文献】截至2024年,关于HepG2细胞的研究已被引用72篇,总的影响因子为467.07,最高影响因子为275。以下是部分代表性文献:1)“Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat” 期刊:Molecular Plant,影响因子:275;2)“Photodegradation of carbon dots causes cytotoxicity” 期刊:Nature Communications,影响因子:149.19;3)“Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression” 期刊:Cell Death and Differentiation,影响因子:137.4。
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